定義:沙門氏桿菌Salmonella
病原性腸道細(xì)菌的一個(gè)屬,包括腸傷寒桿菌。在形態(tài)上和生理上都極似大腸桿菌,但為了醫(yī)學(xué)上的方便,僅從細(xì)菌抗原的構(gòu)成上,根據(jù)而考夫曼(F.Kauffmann)等(1934)提出把它作為一個(gè)獨(dú)立的屬。但它和大腸桿菌,特別是與病原性的副大腸桿菌(Paracolon)、巴氏桿菌及痢疾桿菌等具有共同的抗原成分,區(qū)別并不明顯。沙門氏桿菌是(1—3)×(0.5—0.8)微米的桿菌,除幾個(gè)例外,多具有周生鞭毛可進(jìn)行活潑的運(yùn)動(dòng)。革蘭氏陰性,不形成芽孢,物質(zhì)代謝依其種類而顯示同
主要沙門氏菌的生化特性
型乳酸發(fā)酵和大腸桿菌型的中間型,碳水化合物的利用一般不良。不利用乳糖和蔗糖,不形成吲哚、乙酰甲醇(acetyl me-thylcarbinol),能產(chǎn)生H2S。該菌在普通肉胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,必需營(yíng)養(yǎng)的界限不高,雖然有不少是原養(yǎng)型(prototroph)的,但不能自由生活,都是作為動(dòng)物(從人至鳥)的寄生菌而被發(fā)現(xiàn)的。用熱或酒精處理后調(diào)查結(jié)果表明,菌體抗原(O抗原),是由2—4成分的組合構(gòu)成(用Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ表示),處理前的鞭毛抗原(H抗原)因各種菌大抵是呈二種不同類型的相(phase)而生長(zhǎng),稱為*相和第二相。對(duì)沙門氏桿菌O抗原成分的化學(xué)研究,證明是由多糖構(gòu)成的。這種多糖以半乳糖、甘露糖和鼠李糖的重復(fù)單位為基本結(jié)構(gòu)。毒素與其它腸道細(xì)菌的情況一樣,是內(nèi)毒素,鼷鼠致死量約為0.5毫克左右,是一種多糖磷脂質(zhì)的復(fù)合體。鳥、人、豬對(duì)許多菌都有較高的敏感性,但癥狀上與腸傷寒、副傷寒、食物中毒(主要是腸炎沙門氏菌和鼠傷寒沙門氏菌)一樣,有各種不同的程度。治療上氯霉素zui有效。
沙門氏菌屬(Salmonella)是一大群寄生于人類和動(dòng)物腸道內(nèi)生化反應(yīng)和抗原構(gòu)造相似的革蘭氏陰性桿菌統(tǒng)稱為。1880年Eberth首先發(fā)現(xiàn)傷寒桿菌,1885年Salmon分離到豬霍亂桿菌,由于Salmon發(fā)現(xiàn)本屬細(xì)菌的時(shí)間較早,在研究中的貢獻(xiàn)較大,遂定名為沙門氏菌屬。目前至少有67種O抗原和2000個(gè)以上血清型,所致疾病稱沙門氏菌病。根據(jù)其對(duì)宿主的致病性,可分為三類:①對(duì)人致??;②對(duì)人和動(dòng)物均致?。?/span>③對(duì)動(dòng)物致病。
與人類關(guān)系密切的沙門氏菌有:傷寒沙門氏菌(S.typhi),甲、乙、丙型副傷寒沙門氏菌(S.paratyphiA、B、C),鼠傷寒沙門氏菌(S.typhimurium),豬霍亂沙門氏菌(S.choleraesuis),腸炎沙門氏菌(S.enteritidis)等十余種。一般可簡(jiǎn)稱傷寒桿菌,甲、乙、丙型副傷寒桿菌,鼠傷寒桿菌,豬霍亂桿菌,腸炎桿菌。
一、生物學(xué)性狀
?。ㄒ唬┬螒B(tài)與染色
大小0.6~1.0×2~3um,無(wú)芽胞,一般有鞭毛,無(wú)莢膜,多數(shù)有菌毛,革蘭氏陰性桿菌。
?。ǘ┡囵B(yǎng)特性
兼性厭氧菌,在普通瓊脂平板上形成中等大小、半透明的S型菌落。在腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基上形成無(wú)色菌落。
?。ㄈ┥磻?yīng)
不發(fā)酵乳糖和蔗糖不產(chǎn)生吲哚,不分解尿素,VP試驗(yàn)陰性,大多產(chǎn)生硫化氫。發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖和甘露醇,除傷寒桿菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣外,其他沙門氏菌均產(chǎn)酸產(chǎn)氣。
?。ㄋ模┛乖瓨?gòu)造與分類
主要有O和H兩種抗原。少數(shù)菌具有表面抗原,功能與大腸桿菌的K抗原相似,一般認(rèn)為與毒力有關(guān),故稱Vi抗原。
1.O抗原:為脂多糖,性質(zhì)穩(wěn)定。能耐100℃達(dá)數(shù)小時(shí),不被乙醇或0.1%石炭酸破壞。決定O型原特異性的是脂多糖中的多糖側(cè)鏈部分,以1、2、3等阿拉伯?dāng)?shù)字表示。例如乙型副傷
傷寒病程種各種試驗(yàn)陽(yáng)性率
寒桿菌有4、5、12三個(gè)。鼠傷寒桿菌有1、4、5、12四個(gè);豬霍亂桿菌有6、7二個(gè)。其中有些O抗原是幾種菌所共有,如4、5為乙型副傷寒桿菌和鼠傷寒桿菌共有,將具有共同O抗原沙門氏菌歸為一組,這樣可將沙門桿氏菌屬分為A~Z、O51~O63、O65~O67共有42組。我國(guó)已發(fā)現(xiàn)26個(gè)菌組、161個(gè)血清型。使人類致病的大多屬于A~E組。O抗原刺激機(jī)體主要產(chǎn)生lgM抗體。
2.H抗原:為蛋白質(zhì),對(duì)熱不穩(wěn)定,60℃經(jīng)15分鐘或乙醇處理被破壞。具有鞭毛的細(xì)菌經(jīng)甲醇液固定后,其O抗原全部被H抗原遮蓋,而不能與相應(yīng)抗O抗體反應(yīng)。H抗原的特異性取決于多肽鏈上氨基酸的排列順序和空間構(gòu)型。
的H抗原有兩種,稱為第1相和第2相。第1相特異性高,又稱特異相,用a、b、c等表示,第2相特異性低,為數(shù)種所共有,也稱非特異相,用1、2、3等表示。具有第1相和第2相H抗原的細(xì)菌稱為雙相菌,僅有一相者稱單相菌。每一組根據(jù)H抗原不同,可進(jìn)一步分種或型。H抗原刺激機(jī)體主要產(chǎn)生lgG抗體。
3.Vi抗原:因與毒力有關(guān)而命名為Vi抗原。由聚-N-乙酰-D-半乳糖胺糖醛酸組成。不穩(wěn)定,經(jīng)60℃加熱、石碳酸處理或人工傳代培養(yǎng)易破壞或丟失。新從患者標(biāo)本中分離出的傷寒桿菌、丙型副傷寒桿菌等有此抗原。Vi抗原存在于細(xì)菌表面,可阻止O抗原與其相應(yīng)抗體的反應(yīng)。Vi抗原的抗原性弱。當(dāng)體內(nèi)菌存在時(shí)可產(chǎn)生一定量抗體;細(xì)菌被清除后,抗體也隨之消失。故測(cè)定Vi抗體有助于對(duì)傷寒帶菌者的檢出。
?。ㄎ澹┦删w分型
有些沙門氏菌在血清學(xué)分型的基礎(chǔ)上,可借噬菌體進(jìn)一步分型。傷寒桿菌各菌株的Vi抗原在血清學(xué)上的特異性是一致的,但對(duì)噬菌體有不同的敏感性,可用噬菌體裂解試驗(yàn)分為96個(gè)噬菌體型。我國(guó)常見者有12個(gè)型。傷寒桿菌的噬菌體分型在追蹤傳染源及發(fā)現(xiàn)新型菌株上有實(shí)際意義。
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對(duì)熱抵抗力不強(qiáng),60℃1小時(shí)或65℃經(jīng)15~20分鐘可被殺死。在水中能存活2~3周,類便中可活1~2個(gè)月,可在冰凍土壤中過冬。膽鹽、煌綠等對(duì)屬細(xì)菌的抑制作用較對(duì)其他腸道桿菌為小,故可用其制備腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基,利于分離糞便中的沙門氏菌。
(七)變異
1.H-O變異:指有動(dòng)力的H型菌株失去鞭毛成為無(wú)動(dòng)力的O型菌體。
2.S-R變異:S型菌落在培養(yǎng)基上多次移種后,逐漸失去O抗原變?yōu)?/span>R型菌落,細(xì)菌的毒力也隨之消失。
3.V-W變異:指有Vi抗原的菌株(V型)失去Vi抗原(W型),即細(xì)菌與抗O血清凝集而不再與抗Vi血清凝集,稱為V-W變異。
4.位相變異:將具有第1相和第2相H抗原的接種于瓊脂平板上,所得單個(gè)菌落,有些是第1相,有些是第2相。如任意挑選一個(gè)菌落(第1相或第2相),在培養(yǎng)基上多次移種后,其后代又出現(xiàn)部分是第1相、部分是第2相的不同菌落。
二、致病性免疫
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1.侵襲力:侵入小腸粘膜上皮細(xì)胞,穿過上皮細(xì)胞層到達(dá)上皮下組織。細(xì)菌雖被細(xì)胞吞噬,但不被殺滅,并在其中繼續(xù)生長(zhǎng)繁殖。這可能與Vi抗原和O抗原的保護(hù)作用有關(guān)。菌毛的粘附作用也是細(xì)菌侵襲力的一個(gè)因素。
傷寒感菌
2.內(nèi)毒素:引起發(fā)熱、白細(xì)胞減少。大劑量時(shí)可發(fā)生中毒性休克。內(nèi)毒素可激活補(bǔ)體系統(tǒng)釋放趨化因子,吸引粒細(xì)胞,導(dǎo)致腸道局部炎癥反應(yīng)。
3.腸毒素:有些,如鼠傷寒桿菌可產(chǎn)生腸毒素,性質(zhì)類似腸產(chǎn)毒性大腸桿菌的腸毒素。
?。ǘ┤祟惖纳抽T氏菌病
1.腸熱癥:是傷寒病和副傷寒病的總稱,主要由傷寒桿菌和甲、乙、丙型副傷寒桿菌引起。
典型傷寒病的病程較長(zhǎng)。細(xì)菌到達(dá)小腸后,穿過腸粘膜上皮細(xì)胞侵入腸壁淋巴組織,經(jīng)淋巴管至腸系膜淋巴結(jié)及其他淋巴組織并在其中繁殖,經(jīng)胸導(dǎo)管進(jìn)入血流,引起*次菌血癥。此時(shí)相當(dāng)病程的第1周,稱前驅(qū)期。病人有發(fā)熱、全身不適、乏力等。細(xì)菌隨血流至骨髓、肝、脾、腎、膽囊、皮膚等并在其中繁殖,被臟器中吞噬細(xì)胞吞噬的細(xì)菌再次進(jìn)入血流,引起第二次菌血癥。此期癥狀明顯,相當(dāng)于病程的第2~3周,病人持續(xù)高熱,相對(duì)緩脈,肝脾腫大及全身中毒癥狀,部分病例皮膚出現(xiàn)玫瑰疹。存于膽囊中的細(xì)菌隨膽汁排至腸道,一部分隨糞便排出體外。部分菌可再次侵入腸壁淋巴組織,出現(xiàn)超敏反應(yīng),引起局部壞死和潰瘍,嚴(yán)重者發(fā)生腸出血和腸穿孔。腎臟中的細(xì)菌可隨尿排出。第4周進(jìn)入恢復(fù)期,患者逐漸康復(fù)。
典型傷寒的病程約3~4周。病愈后部分患者可自糞便或尿液繼續(xù)排菌3周至3個(gè)月,稱恢復(fù)期帶菌者。約有3%的傷寒患者成為慢性帶菌者。
副傷寒病與傷寒病癥狀相似,但一般較輕,病程較短,約1~3周即愈。
2.急性腸炎(食物中毒):是zui常見的感染。多由鼠傷寒桿菌、豬霍亂桿菌、腸炎桿菌等引起。系因食入未煮熟的病畜病禽的肉類、蛋類而發(fā)病。潛伏期短,一般4~24小時(shí),主要癥狀為發(fā)熱、惡心、嘔波士頓、腹痛、腹瀉。細(xì)菌通常不侵入血流,病程較短,一般2~4天內(nèi)可*恢復(fù)。
3.?dāng)⊙Y:常由豬霍亂桿菌、丙型副傷寒桿菌、鼠傷寒桿菌、腸炎桿菌等引起。病菌進(jìn)入腸道后,迅速侵入血流,導(dǎo)致組織器官感染,如腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、腎盂腎炎、心內(nèi)膜炎等。出現(xiàn)高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血等。在發(fā)熱期,血培養(yǎng)陽(yáng)性率高。
(三)免疫性
傷寒或副傷寒病后有牢固的免疫性,很少再感染。主要依靠細(xì)胞免疫,表現(xiàn)為單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)在淋巴因子的作用下,胞內(nèi)酶數(shù)量增多,活性增強(qiáng),從而殺死寄生在細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌。
體液免疫方面,局部抗體較重要,尤其是SlgA具有特異性防止傷寒桿菌粘附于腸粘膜表面的能力。抗O和抗Vi抗體能抵抗病原菌的感染。至于血循環(huán)中lgM、lgG抗體對(duì)胞內(nèi)寄生菌無(wú)免疫作用。
三、微生物學(xué)診斷
(一)分離與鑒定
1.標(biāo)本:根據(jù)傷寒病的病程采取不同標(biāo)本,通常第1~2周取血液,第2~3周取糞便或尿液。急性腸炎取患者吐瀉物和剩余食物。敗血癥取血液作培養(yǎng)。
2.分離培養(yǎng)與鑒定:血液應(yīng)先接種膽汗肉湯增菌;糞便和經(jīng)離心的尿沉渣可直接接種腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基。37℃經(jīng)18~24小時(shí)培養(yǎng)后,挑選無(wú)色半透明的不發(fā)酵乳糖的菌落涂片、染色、鏡檢,并接種雙糖含鐵或三糖含鐵培養(yǎng)基。疑為時(shí),作生化反應(yīng)和玻片凝集試驗(yàn)鑒定。
3.快速診斷法:近年來(lái)應(yīng)用葡萄球菌A蛋白協(xié)同凝集試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、放射免疫測(cè)定等方法,檢測(cè)患者血清或尿液中傷寒桿菌、副傷寒桿菌的可溶性抗原,協(xié)助臨床早期診斷腸熱癥。
?。ǘ┭鍖W(xué)試驗(yàn)
常用肥達(dá)(Widal)氏反應(yīng)。即用已知的傷寒桿菌O、H抗原和甲、乙型副傷寒桿菌的H抗原與待檢血作定量凝集試驗(yàn)。根據(jù)抗體含量多少及其增長(zhǎng)情況,輔助臨床診斷腸熱癥。
腸熱癥常由傷寒桿菌,甲、乙型副傷寒桿菌引起,故通常采用上述三種菌的抗原進(jìn)行試驗(yàn)。有的地區(qū)可由丙型副傷寒桿菌引起,應(yīng)增添丙型副傷寒桿菌H抗原作試驗(yàn)。
本試驗(yàn)在腸熱癥患者*周末時(shí),即可出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果。判定結(jié)果時(shí)必須考慮下述情況。
1.正??贵w水平:正常人因隱性感染或預(yù)防接種,血清中可含有一定量抗體,其效價(jià)隨各地區(qū)情況而不同。一般說來(lái),O凝集價(jià)≥1:80、H凝集價(jià)≥1:160時(shí)才有診斷價(jià)值。
2.動(dòng)態(tài)觀察:判斷肥達(dá)氏反應(yīng)結(jié)果須結(jié)合臨床癥狀、病期等。單次凝集效價(jià)增高,有時(shí)不能定論。如間隔數(shù)天重復(fù)采用,若效價(jià)隨病程延長(zhǎng)而逐漸上升4倍以上,有診斷意義。
3.O與H抗體在診斷上的意義:患腸熱癥后,O與H抗體在體內(nèi)的消長(zhǎng)情況不同。LgM型O抗體出現(xiàn)較早,持續(xù)時(shí)間僅半年左右,消失后不易受傷寒、副傷寒桿菌以外細(xì)菌的非特異性抗原刺激而重新出現(xiàn)。lgG型H抗體出現(xiàn)較晚,維持時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)數(shù)年,消失后易受非特異性抗原刺激而短暫地重新出現(xiàn)。因此,①若H、O凝集效價(jià)均超過正常值,則感染傷寒、副傷寒的可能性大;②H與O效價(jià)均低,則患腸熱癥的可能性甚小;③若H效價(jià)高而O不高,可能系預(yù)防接種或非特異性回憶反應(yīng);④如O效價(jià)高而H不高,可能是感染早期或其他沙門氏菌感染(腸炎桿菌與傷寒桿菌有共同O抗原)引起的交叉反應(yīng)。
4.其他:少數(shù)病例在整個(gè)病程中,肥達(dá)氏試驗(yàn)始終呈陰性??赡苁?/span>①發(fā)病早期曾用大量或多種抗生素治療;②患者免疫功能低下。故本試驗(yàn)陰性時(shí),不宜匆忙地否定診斷。
傷寒傷人不同病期血、糞便、尿液中病原菌與特異性凝集素的陽(yáng)性檢出率
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zui可靠的方法是分離培養(yǎng)病原菌,但檢出率不高。一般可先檢測(cè)可疑血清中有無(wú)Vi抗體,當(dāng)效價(jià)>1:10時(shí),再取糞便或尿液多次分離培養(yǎng),才能確定。
四、防治原則
腸熱癥的特異性免疫,以往采用皮下多次接種死菌苗,雖有一定的保護(hù)作用,但常引起局部和全身反應(yīng)。
近十多年來(lái),領(lǐng)帶鏈霉素(Sd)株和Ty-21a株減毒口服活菌苗的副反應(yīng)較小,免疫效果且較持久。Ty-21a活菌苗是缺少尿苷二磷酸半乳糖-4-差向異構(gòu)酶的傷寒桿菌突變株。該菌株失去合成脂多糖的能力,故無(wú)發(fā)熱反應(yīng),無(wú)返祖現(xiàn)象,服用安全,以產(chǎn)生細(xì)胞免疫為主,經(jīng)國(guó)內(nèi)、外現(xiàn)場(chǎng)試用,此菌株安全、穩(wěn)定、有效免疫期至少為三年。
治療可采用氯霉素、氨芐青霉素、羥氨芐青霉素等,中藥白花蛇舌草,穿心蓮等有效。
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